聯系電話：
18502669006
服務熱線： 15502280048
服務熱線： 
植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA檢測試劑盒技術說明書
BS-4938 植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBisCO)ELISA試劑盒 96T/48T
產品概述
本試劑盒用于體外定量檢測植物組織、細胞及相關液體樣本中核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(RuBisCO)的活性。該酶是植物光合作用Calvin循環的關鍵酶，其活性直接影響光合速率和光呼吸過程。本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)，具有高靈敏度和特異性。
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法：
預包被抗RuBisCO單抗的微孔板捕獲樣本中的目標酶
加入HRP標記的檢測抗體形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物
經洗滌后，加入TMB顯色底物
反應終止后，酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值)
樣品中RuBisCO濃度與OD值呈正相關
試劑盒組成
組分 規格 保存條件
預包被微孔板 12×8孔 4℃
標準品(6個濃度梯度) 0.3mL×6管 -20℃
酶標抗體 15mL 4℃
20×洗滌緩沖液 50mL 室溫
TMB顯色液A/B 各15mL 4℃避光
終止液 15mL 室溫
樣本稀釋液 30mL 4℃
樣本處理
組織樣本
稱取0.1g組織，加入1mL提取液冰浴勻漿
10,000g 4℃離心10分鐘
取上清液立即檢測或-80℃保存(避免反復凍融)
細胞樣本
收集細胞沉淀，加入提取液裂解
10,000g 4℃離心10分鐘
取上清液檢測
血清/液體樣本
室溫靜置2小時或4℃過夜
1,000g離心20分鐘
取上清液檢測
注意事項?：
避免樣本溶血
NaN3會抑制HRP活性，禁用含疊氮鈉樣本
新鮮樣本優先，凍存樣本避免反復凍融
操作步驟
準備試劑?：所有試劑使用前平衡至室溫(20-25℃)
加樣?：
標準品孔：50μL不同濃度標準品
樣本孔：50μL待測樣本
空白孔：不加
溫育?：每孔加入100μL酶標抗體，37℃避光反應60分鐘
洗滌?：每孔加350μL洗滌液，靜置1分鐘后甩干，重復5次
顯色?：每孔加入50μL底物A和B，37℃避光反應15分鐘
終止?：每孔加入50μL終止液
測定?：15分鐘內用酶標儀測定450nm OD值
結果計算
以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制標準曲線
根據樣本OD值在標準曲線上查得濃度
樣本濃度=測得濃度×稀釋倍數(如有)
性能指標
檢測范圍：18-650 U/L
靈敏度：≤5 U/L
批內變異系數：<10%
批間變異系數：<15%
注意事項
試劑盒有效期6個月，2-8℃保存
不同批號試劑不可混用
顯色液避光保存
洗滌不凈會導致假陽性
終止液含腐蝕性物質，操作時需防護
所有廢棄物按生物危害物處理
所需儀器
酶標儀(450nm濾光片)
精密移液器(0.5-1000μL)
37℃恒溫箱
洗板機(可選)
渦旋混合器
注：供科研使用，以上資料供參考，不作為實驗依據，具體請咨詢技術老師是或品牌商。
本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。
