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大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
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  大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

  BS-3204  大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒

  一、試劑盒簡(jiǎn)介

  本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù),用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿或組織勻漿樣本中的組蛋白H2b(histon-H2b)含量。

  二、試劑盒組成

  預(yù)包被抗體的96孔微孔板

  標(biāo)準(zhǔn)品(不同濃度梯度)

  辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體

  20×洗滌緩沖液

  TMB顯色底物

  終止液

  封板膜

  說(shuō)明書(shū)

  三、儲(chǔ)存條件

  未開(kāi)封試劑盒:2-8℃避光保存,有效期6個(gè)月

  已開(kāi)封試劑盒:

  標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)抗體:-20℃保存

  微孔板:干燥劑密封后-20℃保存

  其他組分:2-8℃保存

  使用前所有試劑需平衡至室溫(20-25℃)

  四、樣本處理

  1. 血清樣本

  采集后室溫靜置10-20分鐘

  2000-3000rpm離心20分鐘

  小心吸取上清,避免溶血

  如有沉淀需再次離心

  2. 血漿樣本

  使用EDTA或肝素抗凝

  混合后離心條件同血清

  避免使用疊氮鈉作為防腐劑

  3. 組織樣本

  稱(chēng)取組織重量后加入PBS(pH7.4)

  液氮速凍后研磨勻漿

  離心取上清(建議1:3-1:5稀釋)

  五、實(shí)驗(yàn)步驟

  1. 試劑準(zhǔn)備

  洗滌液配制:將20×濃縮液用蒸餾水按1:19稀釋(1份濃縮液+19份水)

  2. 加樣

  取出平衡后的微孔板,設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔

  標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品

  樣本孔:加入50μL待測(cè)樣本

  空白孔:不加任何試劑

  3. 溫育

  每孔加入100μL HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體

  封板膜密封,37℃恒溫箱溫育60分鐘

  4. 洗滌

  棄去孔內(nèi)液體,吸水紙拍干

  每孔加入350μL洗滌液,靜置1分鐘

  重復(fù)洗滌5次(手工或洗板機(jī)操作)

  5. 顯色

  每孔加入90μL TMB底物,37℃避光顯色15-20分鐘

  加入50μL終止液終止反應(yīng)

  6. 測(cè)定

  450nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔OD值

  空白孔調(diào)零

  六、結(jié)果計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

  樣品OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程計(jì)算濃度

  若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)范圍,需用樣本稀釋液稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)

  七、注意事項(xiàng)

  所有操作需在生物安全柜中進(jìn)行,廢棄物按傳染性物質(zhì)處理

  不同批號(hào)試劑不可混用

  顯色液需避光保存

  封板膜一次性使用

  實(shí)驗(yàn)前需預(yù)實(shí)驗(yàn)確定樣本稀釋倍數(shù)

  建議設(shè)置復(fù)孔檢測(cè)

  八、性能指標(biāo)

  靈敏度:≤0.1 ng/mL

  檢測(cè)范圍:0.3-20 ng/mL

  批內(nèi)變異系數(shù):<9%

  批間變異系數(shù):<11%

  回收率:85-115%

  九、常見(jiàn)問(wèn)題處理

  高背景:檢查洗滌是否充分,底物是否污染

  低信號(hào):確認(rèn)抗體活性,檢查溫育時(shí)間

  異常值:重復(fù)檢測(cè),確認(rèn)樣本處理過(guò)程

  (注:本說(shuō)明書(shū)為通用版本,具體操作請(qǐng)以實(shí)際試劑盒附帶說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn))

  注:供科研使用,以上資料供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),具體請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌商。

   本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。

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