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小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-2262 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成
固相載體：預(yù)先包被小鼠BMPs捕獲抗體的96孔微孔板(每孔0.1ml)
酶標(biāo)記物：HRP標(biāo)記的小鼠BMPs檢測(cè)抗體(120μl)
底物系統(tǒng)：TMB顯色液(6ml)+終止液(6ml)
標(biāo)準(zhǔn)品：6管凍干標(biāo)準(zhǔn)品(濃度范圍156.25-5000 pg/ml)
輔助試劑：洗滌緩沖液(20×濃縮液)、樣本稀釋液、封板膜
二、樣本處理
血清/血漿：
室溫凝固10-20分鐘，3000rpm離心10分鐘取上清
避免溶血(血漿需EDTA/檸檬酸鹽抗凝)
細(xì)胞上清：
3000rpm離心10分鐘去除顆粒
組織勻漿：
生理鹽水搗碎后3000rpm離心10分鐘
保存條件：
2-8℃保存≤24小時(shí)，長(zhǎng)期保存需分裝凍存于-20℃
三、操作步驟
包被：
4℃過夜孵育(抗原濃度需優(yōu)化)
洗滌：
棄孔內(nèi)溶液，3次洗滌(每次3分鐘)
加樣：
樣本/標(biāo)準(zhǔn)品50μl+HRP抗體50μl，37℃孵育1小時(shí)
顯色：
TMB底物50μl，37℃避光10-30分鐘
終止：
加終止液50μl，15分鐘內(nèi)測(cè)OD值
四、結(jié)果計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)曲線：
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線
樣本濃度：
樣本OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)
定量范圍：
156.25-5000 pg/ml(靈敏度<10 pg/ml)
五、注意事項(xiàng)
試劑保存：
試劑盒2-8℃保存，有效期6個(gè)月
洗滌液結(jié)晶需水浴溶解后使用
操作規(guī)范：
避免交叉污染(加樣槍需校準(zhǔn))
終止液含強(qiáng)酸，接觸后立即沖洗
實(shí)驗(yàn)限制：
僅用于科研，不得用于臨床診斷
樣本值超范圍需重新稀釋測(cè)定
注：供科研使用，以上資料供參考，不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌商。
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